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第765章 隐蔽 狡猾 善变(2/3)

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这时英国那位教授A突然说道:“西弗,在讨论对策之前,我其实还想问个问题。”

“什么问题?”

“这位实验技术员有没有皮肤上的症状?”

“......有。”西弗稍稍考虑了会儿,回道,“不过皮肤上的症状并不明显,因为首发的是难治性肺炎,皮疹直到最后两天才出现,现在没有破溃的迹象,治疗还在跟进。”

“哦?是和之前截然不同的发展方向。”

“这点就很奇怪了,铜绿假单胞菌会造成皮疹么?”

这个问题很好回答,答案自然是不会,皮肤如此干燥的环境并不适合铜绿假单胞菌的生长。

“难道呼吸道也有金葡菌?”

“有,但并不多,检出率不算高,主要还是铜绿假单胞菌为主。”西弗说道,“所以我刚才就说变异菌株的说法并不正确,如果真的只是变异铜绿假单胞菌,那就不该出现皮疹才对。再怎么变异,菌群基本的生存环境不应该出现变化才对。”

“好奇怪啊......”

“难道是铜绿菌株里混了金葡菌?”

“对,还是听听实验经过,看看有没有什么不太对的地方。”

【......大鼠经20%乌拉坦1.25gkg麻醉后固定,用16号钝针头从口腔插入气管,将配好的藻酸盐包被的铜绿假单胞菌菌悬液无菌悬液0.2ml注入气管,并左右旋转体位,使菌液均匀分布于两肺。

待大鼠苏醒后放入无菌笼中,自由取食,每日观察进食、毛发、精神状态等一般情况。

在接种后的3、7、14、28d,每组选8~14只大鼠,进行细菌学和病理学指标检测。

虽然检测还需要过几天,不过我还是先说说检测使用的方式吧。

主要用的方式是两种,第一种是肺组织匀浆活菌计数:我会在四个时间点,每组随机选9-12只大鼠,注射致死剂量的20%乌拉坦处死,分离出肺组织,称重,放入组织研磨器中,于4℃冰浴下制成肺组织匀浆。

将匀浆倍比稀释至10-6,分别取各浓度的匀浆0.1ml用玻璃棒均匀涂布于M-H琼脂平板上,放入35℃孵箱中孵育24h,选取菌落在30~300个之间的平板进行菌落计数。

其二病理学分析:每组随机选8-11只大鼠,处死后,分离出肺组织,再用4%多聚甲醛缓冲液固定,常规石蜡包埋切片,苏木素-伊红(HE)染色,通过显微病理成像分析系统比较炎症的范围及程度。

今天记录到此为止......】

“方法没问题!”教授A一听到咔嚓声就直接说出了自己的想法,“我个人还是倾向于刚才教授D所说的观点,应该是菌株本身的问题。”

“所以现在问题来了,菌株有没有问题还得看实验结果如何。”教授D接了话,问道,“但这个技术员出现了难治性肺炎,所以实验中断了吧?”

西弗说道:“肺炎确实来得很快,第二天就出现了明显的呼吸道症状,第三天开始发烧。不过他坚持了一天,第三天还是回实验室做了实验。”

【接种后一天,PAO1感染组大鼠置管后活力明显下降,进食和饮水减少,毛发紊乱。对照组大鼠置管后一般情况的变化明显轻于PAO1感染组。

昨天也就是接种的第二天,PAO1组死亡了18只,今天死亡了11只,总计死亡29只。

咳咳咳~咳咳~~

对照组也出现了2只死亡,死因应该是肺部异物造成的炎症感染.....咳咳~~~

这时的对照组已经完全恢复了正常活动和饮食,而感染组恢复的数量只有7只,其余的大鼠仍然有不同程度的病态情况,通常会在3-10d恢复正常......咳咳咳......】

“没了?”

“能找到的录音只有这些了,实验第四天就进了医院,并且不过之后由他的同事做了后续的记录。”西弗说道,“实验到了这一步,你们觉得怎么样?”

“很常见的细菌感染模型实验,没什么问题。”

“死亡率会不会太高了?”

“大鼠的体重还算比较轻,这点剂量,死亡率高一些也没什么问题。”教授D说道,“不过话说回来,没有后面几天的死亡数据,我们也没办法给菌株定性。”

西弗很快拿出了他们想要的东西。

对于普通的铜绿假单胞菌PAO1感染来说,受接种的大鼠死亡率不会太高,一般也就在10%-30%上下。但只要过了前三天,后面出现死亡的情况会直线下降,感染会迅速从急性期转入慢性。

这点不仅能从症状上显现出来,PAO1组的大鼠确实在3天后,病态症状逐渐恢复,直到第10天后基本回到了原先正常的状态。

此外,还能通过之前技术员所说的病理切片上看出端倪。

如果按照正常的感染发展,在第3天,PAO1感染组大鼠肺泡内会有不同程度的水肿、出血,并可见中性粒细胞聚集在藻酸盐包被体周围,形成支气管、肺泡的多处脓肿。

到了感染后的第7天,肺泡内水肿会逐渐消退,转而以肺泡内纤维素渗出,中性粒细胞聚集为主要表现。脓肿会被这些渗出包绕,使得界限更为清晰。

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